gao效液(ye)相(xiang)色譜(pu)保(bao)養(yang)｜HPLC系(xi)統的(de)酸(suan)清洗(xi)和(he)鈍(dun)化(hua)

gao效液(ye)相(xiang)色譜(pu)保(bao)養(yang)｜HPLC系(xi)統的(de)酸(suan)清洗(xi)和(he)鈍(dun)化(hua)
HPLC系(xi)統內部可(ke)能的(de)汙(wu)染物來自人的(de)觸摸(mo)，暴露(lu)在實(shi)驗(yan)室(shi)化(hua)學環(huan)境(jing)，與零部(bu)件(jian)制(zhi)造(zao)相(xiang)關(guan)的(de)殘留物，或來自先前的(de)流動相和樣品的(de)殘余物。
雖(sui)然(ran)系(xi)統自身也會逐(zhu)步(bu)地(di)被(bei)流動相清洗(xi)，但(dan)某(mou)些釋放(fang)出的(de)雜質會(hui)吸(xi)附在(zai)色譜柱上(shang)以(yi)及檢測器潤濕的(de)表面(mian)上(shang)，因而會(hui)降(jiang)低總的(de)性能。
磷酸(suan)清洗(xi)
通(tong)常(chang)用(yong)於從(cong)系(xi)統中(zhong)除(chu)去有機(ji)雜質。可(ke)能是由(you)於洗(xi)滌(di)作(zuo)用(yong)，它似乎比(bi)強有機(ji)溶(rong)劑更(geng)好也(ye)更(geng)快(kuai)。這(zhe)壹(yi)步(bu)清洗(xi)必須在(zai)硝酸(suan)鈍(dun)化(hua)之(zhi)前(qian)完(wan)成(cheng)。
硝酸(suan)鈍(dun)化(hua)
實(shi)際上(shang)是作(zuo)用(yong)於不銹(xiu)鋼表面(mian)，在(zai)表(biao)面(mian)上(shang)生(sheng)成均勻(yun)的(de)氧化(hua)層(ceng)。這(zhe)層(ceng)氧(yang)化(hua)膜(mo)保(bao)護(hu)不銹(xiu)鋼免受腐蝕（鹵化(hua)物，螯合劑，等等）並(bing)且盡量(liang)減(jian)少浸(jin)出的(de)金屬離(li)子進(jin)入(ru)流(liu)動相。
以下應(ying)用(yong)需要在使(shi)用(yong)前(qian)做磷酸(suan)清洗(xi)和(he)硝酸(suan)鈍(dun)化(hua)
包(bao)括：
•suo有的(de)氨基酸(suan)分(fen)析系(xi)統
•suo有包(bao)含(han)電(dian)化(hua)學檢測器的(de)系(xi)統
•suo有要分(fen)析無機陽離(li)子，包(bao)括過渡(du)金(jin)屬的(de)系(xi)統
•suo有利(li)用(yong)柱後(hou)添(tian)加衍生(sheng)試劑(ji)或絡合樣品組分(fen)的(de)系(xi)統
以下應(ying)用(yong)需要在使(shi)用(yong)前(qian)只做磷(lin)酸(suan)清洗(xi)
包(bao)括：
•suo有常(chang)規(gui)用(yong)途的(de)、可(ke)能在低(di)pH環(huan)境(jing)下在低紫外檢測波(bo)長(chang)下運行的(de)HPLC系(xi)統
•suo有需要高(gao)靈(ling)敏(min)度性能的(de)梯度紫外檢測系(xi)統
系(xi)統清洗(xi)指南
註(zhu)意：在(zai)實(shi)行(xing)這(zhe)個(ge)程(cheng)序時采用(yong)適(shi)當(dang)的(de)安全防(fang)護(hu)措(cuo)施(shi)

準備工作(zuo)：
首(shou)先(xian)，摘下色譜柱，用(yong)兩(liang)通或接頭取代(dai)色(se)譜(pu)柱。在(zai)實(shi)行(xing)這(zhe)壹(yi)清洗(xi)步(bu)驟時，如果有可(ke)能選擇監(jian)測的(de)紫外波(bo)長(chang)為(wei)：254nm。通(tong)過軟(ruan)件(jian)或移去電(dian)纜(lan)的(de)方式取(qu)消(xiao)紫外檢測器的(de)自動回(hui)零功(gong)能。

具體(ti)步(bu)驟：
1、用(yong)甲醇(chun)*沖洗(xi)系(xi)統，以等比(bi)例方(fang)式通(tong)過泵(beng)的(de)suo有管(guan)路。

2、用(yong)水(shui)*沖洗(xi)系(xi)統，以等比(bi)例方(fang)式通(tong)過泵(beng)的(de)suo有管(guan)路。

3、以(yi)等比(bi)例方(fang)式通(tong)過泵(beng)的(de)suo有管(guan)路導(dao)入(ru)～30%v/v磷(lin)酸(suan)水(shui)溶(rong)液(ye)。以1mL/min流速洗(xi)大(da)約壹個(ge)小時。在(zai)沖洗(xi)期(qi)間(jian)活(huo)動suo有的(de)閥(fa)，包(bao)括：參比(bi)閥(fa)、進(jin)樣閥(fa)及旁路閥(fa)等等。
4、用(yong)水(shui)*沖洗(xi)suo有管(guan)路和(he)系(xi)統。
必要時用(yong)6N硝酸(suan)（HN03）重(zhong)復(fu)以(yi)上步(bu)驟。否則，跳到(dao)第7步(bu)。註(zhu)意：硝酸(suan)是壹(yi)個(ge)強(qiang)紫外吸收(shou)溶(rong)液(ye)。除(chu)非jue對需要，不要做鈍(dun)化(hua)程(cheng)序

5、以等比(bi)例方(fang)式通(tong)過泵(beng)的(de)suo有管(guan)路導(dao)人6N硝酸(suan)水(shui)溶(rong)液(ye)（大約是40%）。以(yi)1mL/min流(liu)速洗(xi)大(da)約壹個(ge)小時。

6、用(yong)水(shui)*沖洗(xi)系(xi)統，仔細(xi)檢查是否有任(ren)何滲漏(lou)，在沖洗(xi)期(qi)間(jian)反(fan)復活動suo有的(de)閥(fa)，包(bao)括：參比(bi)閥(fa)、進(jin)樣閥(fa)及旁路閥(fa)等等。

註(zhu)意：如果妳(ni)要用(yong)低(di)於270nm的(de)紫外波(bo)長(chang)作(zuo)檢測，則需要更(geng)大量(liang)水的(de)清洗(xi)過(guo)程(cheng)，不(bu)斷的(de)換新鮮水並活(huo)動各(ge)個(ge)閥(fa)（沖洗(xi)進(jin)樣器，等）以(yi)便(bian)從(cong)系(xi)統中(zhong)除(chu)去suo有的(de)痕量(liang)硝酸(suan)根(gen)離(li)子。硝酸(suan)清洗(xi)後(hou)經(jing)常在(zai)幾(ji)天(tian)之內(nei)都(dou)會觀察(cha)到(dao)在低(di)紫外波(bo)長(chang)下有負的(de)基線漂移。勤(qin)換水和(he)有耐心是盡快(kuai)消(xiao)除(chu)紫外本底(di)的(de)關鍵。

7、返(fan)回(hui)到(dao)甲醇(chun)洗(xi)，然(ran)後(hou)繼續(xu)用(yong)實(shi)驗(yan)所需的(de)溶劑沖洗(xi)。
8、通(tong)過(guo)軟(ruan)件(jian)或接上(shang)電(dian)纜(lan)的(de)方式重(zhong)新使(shi)紫外檢測器的(de)自動回(hui)零功(gong)能恢復(fu)。